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生物素系統(tǒng)在ELISA試劑盒中的應(yīng)用有多種形式

發(fā)布時間:2012-07-26瀏覽:1394次

    親和素-生物素系統(tǒng)在ELISA試劑盒中的應(yīng)用有多種形式,可用于間接包被,亦可用于終反應(yīng)放大??梢栽诠滔嗌舷阮A(yù)包被親和素,原用吸附法包被固相的抗體或抗原與生物素結(jié)合,通過親和素-生物素反應(yīng)而使生物素化的抗體或抗在相化。

    這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量,而且使其結(jié)合點充分暴露。另外,在常規(guī)ELISA試劑盒中的酶標(biāo)抗體也可用生物素化的抗體替代,然后連接親和素-酶結(jié)合物,以放大反應(yīng)信號。

    應(yīng)用親和素和生物素的ELISA試劑盒,親和素是一種糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每個分子由4個亞基組成,可以和4個生物素分子親密結(jié)合?,F(xiàn)在使用更多的是從鏈霉菌中提取的鏈霉親和素。生物素又稱維生素H,分子量244.31,存在于蛋黃中。用化學(xué)方法制成的衍生物,生物素-羥基琥珀亞胺酯(BNHS)可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理化的產(chǎn)物。

    上海ELISA試劑盒親和素與生物素的結(jié)合,雖不屬免疫反應(yīng),但特異性強(qiáng),親和力大,兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個親和素分子有4個生物素分子的結(jié)合位置,可以連接更多的生物素化的分子,形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和生物素與ELISA試劑盒偶聯(lián)起來,就可大大提高ELISA試劑盒的敏感度。

 

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