S-180細(xì)胞，小鼠肛門(mén)肉瘤細(xì)胞   培養(yǎng)需注意：

細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)所需的物品、器材應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌或購(gòu)買(mǎi)無(wú)菌的一次性物品。玻璃瓶可擰松瓶蓋滅菌（指高壓蒸汽滅菌，以下同）或用鋁箔紙包住瓶口，和瓶蓋分別滅菌。其它玻璃和金屬器材用鋁箔紙包裹進(jìn)行滅菌。玻璃吸管應(yīng)塞上棉花球滅菌，然后置于烘箱中烘干。不適于進(jìn)行高壓滅菌的瓶塞等其它物品，可浸泡在70%酒精中進(jìn)行滅菌，然后在超凈工作臺(tái)上吹干。細(xì)胞培養(yǎng)液和其它不適于高壓滅菌的溶液，應(yīng)通過(guò)過(guò)濾（采用0.22μm的孔徑的濾膜）滅菌。無(wú)菌培養(yǎng)室每天都要用0.2%的新潔爾滅拖地面一次，并用紫外線照射滅菌30分鐘。超凈工作臺(tái)每次使用前用70%酒精擦拭，然后紫外線照射30分鐘。

進(jìn)入無(wú)菌操作室要求穿著無(wú)菌工作服、工作帽、口罩。開(kāi)始工作前用70%酒精對(duì)手、前臂及乳膠手套進(jìn)行消毒。細(xì)胞培養(yǎng)等操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)或有空氣過(guò)濾器的空間內(nèi)進(jìn)行。操作前點(diǎn)燃酒精燈，細(xì)胞培養(yǎng)的所有操作，如打開(kāi)或關(guān)上試管或培養(yǎng)瓶蓋等，都要靠近酒精燈并經(jīng)過(guò)短時(shí)間的灼燒。燒過(guò)的實(shí)驗(yàn)器械，冷卻后才能使用。已吸過(guò)培養(yǎng)液或其它有機(jī)液體的吸管不得再用火焰燒灼。不同液體分別用不同的吸管吸取，不能混用。開(kāi)蓋后的培養(yǎng)瓶盡量避免垂直放置，同時(shí)瓶蓋應(yīng)扣放在超凈工作臺(tái)上，以減少落入細(xì)菌的機(jī)會(huì)。細(xì)胞培養(yǎng)物在處理和使用前，不要過(guò)早暴露于空氣中。在進(jìn)行轉(zhuǎn)移液體操作時(shí)，移液器不能觸及瓶口以避免細(xì)菌污染或交叉污染。放置吸管時(shí)管口向下傾斜，以防止液體倒流引起污染。培養(yǎng)細(xì)胞的廢棄用品，應(yīng)放入可封裝的容器內(nèi)。

S-180細(xì)胞，小鼠肛門(mén)肉瘤細(xì)胞  的凍存

細(xì)胞凍存的原則是要逐步緩慢降溫，以避免細(xì)胞內(nèi)部形成冰晶對(duì)細(xì)胞造成傷害。
1) 貼壁細(xì)胞經(jīng)消化、離心收集，懸浮細(xì)胞經(jīng)離心收集；
2) 大約10⁶個(gè)細(xì)胞加入1ml凍存液（細(xì)胞培養(yǎng)液和10%DMSO），用吸管吹打，使細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液；
3) 加入到凍存管中。如用1.8ml的凍存管，每管不要加入超過(guò)1.5ml的細(xì)胞懸液；
4) 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞名稱(chēng)及凍存日期；
5) 用厚布或衛(wèi)生紙包裹凍存管，置于4℃半小時(shí)，然后置于-20℃兩小時(shí)，再置于-40℃兩小時(shí)，然后置于液氮上方置夜；第二天將細(xì)胞置于液氮中；如果僅想提取細(xì)胞內(nèi)的東西可以直接放在-20度的冰箱中。
6) 記下凍存管存放的位置，作好凍存記錄。

 其他細(xì)胞：

MA-h細(xì)胞  BHK-21細(xì)胞    HBF細(xì)胞BHK-21細(xì)胞   MM細(xì)胞 HDF-a細(xì)胞 HSkMC細(xì)胞HBMEC細(xì)胞  MLF細(xì)胞    HHDPC細(xì)胞 HSk95D細(xì)胞HBVSMC細(xì)胞   MREpiC細(xì)胞    HHZMC細(xì)胞 HSkMM細(xì)胞HBVAF細(xì)胞  MCM細(xì)胞    HHorSC細(xì)胞    HACC細(xì)胞HBVP細(xì)胞    MMSC-bm細(xì)胞   HHirSC細(xì)胞    HRGEC細(xì)胞HCPEC細(xì)胞  MEF細(xì)胞  HHFK細(xì)胞  HRPTEpiC細(xì)胞BHK-21細(xì)胞 MEF-mt細(xì)胞    HLEC細(xì)胞HRCEpiC細(xì)胞HCPF細(xì)胞  RPC細(xì)胞    HLF細(xì)胞   HREpiC細(xì)胞HMC細(xì)胞   RMC細(xì)胞HOK細(xì)胞  HRMC細(xì)胞HN細(xì)胞  RNr細(xì)胞   HGF細(xì)胞    HBdMEC細(xì)胞HCGC細(xì)胞  RNsn細(xì)胞  HPDLF細(xì)胞 HBdSMC細(xì)胞HN-h細(xì)胞  RGC細(xì)胞   HEEC細(xì)胞  HUC細(xì)胞

HOPC細(xì)胞  RHh細(xì)胞   HESMC細(xì)胞 HBdSF細(xì)胞HOPC-os細(xì)胞   BHK-21細(xì)胞HGSMC細(xì)胞 HPEpiC細(xì)胞HO細(xì)胞  RNs細(xì)胞   HIMEC細(xì)胞 BHK-21細(xì)胞HSC細(xì)胞   RSCMN細(xì)胞 HISMC細(xì)胞 HPSMC細(xì)胞HPNC細(xì)胞   RDSCI細(xì)胞   HCMEC細(xì)胞HCO細(xì)胞HA細(xì)胞    RVSCI細(xì)胞 HCSMC細(xì)胞 HS細(xì)胞Hac細(xì)胞   ROPC細(xì)胞  HPMEC細(xì)胞    HNPC細(xì)胞HA-sp細(xì)胞   RSC細(xì)胞   HPAEC細(xì)胞 HAFC細(xì)胞HA-h細(xì)胞RPNF細(xì)胞  HPASMC細(xì)胞    HHSEC細(xì)胞HM細(xì)胞   RA細(xì)胞 HPAF細(xì)胞  HH細(xì)胞

95D細(xì)胞   RAc細(xì)胞   HPAEpiC細(xì)胞   HHSteC細(xì)胞HDLEC細(xì)胞 RAh細(xì)胞HBEpiC細(xì)胞   HCAEC細(xì)胞HDSMC細(xì)胞   RM細(xì)胞 HTEpiC細(xì)胞    HAEC細(xì)胞HEK-n細(xì)胞   RLF細(xì)胞   HSAEpiC細(xì)胞   HASMC細(xì)胞HEK-a細(xì)胞    RRTEpiC細(xì)胞HPF細(xì)胞  HAF細(xì)胞HEM細(xì)胞  RCM細(xì)胞   HBSMC細(xì)胞 HCM細(xì)胞HDF-f細(xì)胞RMSC-bm細(xì)胞    HTSMC細(xì)胞 HCMa細(xì)胞MH-h細(xì)胞    HTMC細(xì)胞  HMSC-bm細(xì)胞HCF細(xì)胞BHK-21細(xì)胞 HConEpiC細(xì)胞    HMSC-ad細(xì)胞   HCFav細(xì)胞MGC細(xì)胞HAEpic細(xì)胞   HMSC-HE細(xì)胞   HCFaa細(xì)胞MN-vsc細(xì)胞 HVMF細(xì)胞    HU95D細(xì)胞HcorF細(xì)胞MN-dsc細(xì)胞 HA95D細(xì)胞 HP95D細(xì)胞 HREC細(xì)胞MOPC細(xì)胞    HPA-v細(xì)胞 HVMSC cDNA細(xì)胞  HRPEpiC細(xì)胞95D細(xì)胞  HPA-s細(xì)胞 HMMEC細(xì)胞HLEpiC細(xì)胞MPNF細(xì)胞  HOMEC細(xì)胞 HMEpiC細(xì)胞  HIPEpiC細(xì)胞MA細(xì)胞HOSEpiC細(xì)胞 HMF細(xì)胞   HConF細(xì)胞MA-c細(xì)胞   HOF細(xì)胞   HVVEC細(xì)胞HNPCEpiC細(xì)胞HUAEC細(xì)胞  MPC細(xì)胞   MN-sn細(xì)胞 HDMEC細(xì)胞BHK-21細(xì)胞MMC細(xì)胞   BHK-21細(xì)胞    HUVSMC細(xì)胞HUASMC細(xì)胞   MN-r細(xì)胞  HCPEpiC細(xì)胞BHK-21細(xì)胞MN-c細(xì)胞    HPrF細(xì)胞  HDF-n細(xì)胞    RNc細(xì)胞